產(chǎn)品名稱(chēng):DEAE Sephadex A-50
產(chǎn)品型號(hào):17-0180-02
產(chǎn)品特點(diǎn):(一) 原理DEAE-SephadexA-50(二乙基氨基乙基-葡聚糖A-50)為弱堿性陰離子交換劑。用NaOH將CL-型轉(zhuǎn)變?yōu)?OH型后,可吸附酸性蛋白。血清中的γ球蛋白屬于中性蛋白(等電點(diǎn)為PH6.85~7.5),其余均屬酸性蛋白。在PH7.2~7.4的環(huán)境中,酸性蛋白均被DEAE-Sephadex A-50吸附,只有γ球蛋白不被吸附。因此,通過(guò)柱層析γ球蛋白便可在洗脫中先流出,而其他
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DEAE-Sephadex A-50
柱層析純化免疫球蛋白原理
DEAE-sephadexA-50
柱層析是離子交換層析的一種。
(四) 注意事項(xiàng)
1.柱的選擇:從理論上說(shuō),只要柱足夠長(zhǎng),就得獲得理想的分辨率,但由于層析柱流速同壓力梯度有關(guān),柱長(zhǎng)增加使流速減慢,峰變寬,分辨率降低。柱的直徑增加,使液體流動(dòng)的不均勻性增加,分辨率明顯下降。
2.純化過(guò)程必須嚴(yán)格控制脫緩沖液的PH及離子強(qiáng)度。樣品與A-50凝膠必須用洗脫緩沖液*平衡后,才能進(jìn)行柱層析。
3.所裝的柱床必須表面平整,無(wú)溝流及氣泡,否則應(yīng)重裝。
4.洗脫過(guò)程中應(yīng)嚴(yán)格控制流速,且勿過(guò)快。
5.上樣的體積要小,濃度不宜過(guò)高。
6.加樣及整個(gè)洗脫過(guò)程中,嚴(yán)防柱面變干。
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