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細菌蛋白提取試劑盒

細菌蛋白提取試劑盒用于大腸桿菌提取可溶性蛋白，試劑盒中的裂解液含有蛋白酶抑制劑，作用較為強烈，可快速獲得總蛋白，可用于免疫印跡實驗等基礎研究實驗，由于含有上述的酶抑制劑，不能用于研究蛋白激酶的研究。細菌蛋白提取試劑僅用于科研。

操作方法:
1、細菌可溶性蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的蛋白酶抑制劑和PMSF；混勻，放置在冰上備用；
將菌體濕重稱重，然后按照比例（1g：10ml）加入的新配置的裂解液，混勻，過程注意冰上操作；
將混勻液移入超聲儀中，超聲；
超聲條件：總時間45min，超聲時間3s，間隔時間3s，過程為冰浴環境；
超聲結束，w4度離心，10000r/min20min；
吸取上清新的管中；
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復凍融，避免長時間儲存。)

注意事項：
實驗過程，所有試劑都要需要預冷或者即融，保證操作過程中的低溫環境；
PSMF（有毒）現用現加，因為PMSF在水溶液中會快速降解；

相關文獻：
《Proanthocyanidins Protect against β-Hydroxybutyrate-Induced Oxidative Damage in Bovine Endometrial Cells》 作者:Xi Cheng,Shuhua Yang,Chuang Xu, Lanzhi Li,Yi Zhang, Yang Guo, Cai Zhang, Peng Li, Miao Long,Jianbin He 期刊:Molecules. 影響因子:3.098 PMID:30678309
《Luteoloside attenuates neuroinflammation in focal cerebral ischemia in rats via regulation of the PPARγ/Nrf2/NF-κB signaling pathway》 作者:Qiaoling Li,Zixia Tian,Minghui Wang,Jiejian Kou,Chunli Wang,Xuli Rong,Jing Li,Xinmei Xie,Xiaobin Pang 期刊:International Immunopharmacology 影響因子:3.361 PMID:30502652
《β?elemene inhibits oxygen?induced retinal neovascularization via promoting miR?27a and reducing VEGF expression》 作者:Weilai Zhang, Lei Chen ,Jin Geng, Limin Liu, Li Xu 期刊:Molecular Medicine Reports 影響因子:1.851 PMID:30664207
《Antitumor effect of triptolide in T-cell lymphoblastic lymphoma by inhibiting cell viability, invasion, and epithelial–mesenchymal transition via regulating the PI3K/AKT/mTOR pathway》 作者:Feng Qiu, Huijuan Tong, Yawen Wang, Jun Tao, Hailin Wang & Lei Chen 期刊:Onco Targets Ther 影響因子:3.046 PMID:29483777

用于大腸桿菌提取可溶性蛋白，試劑盒中的裂解液含有蛋白酶抑制劑，作用較為強烈，可快速獲得總蛋白，可用于免疫印跡實驗等基礎研究實驗，由于含有上述的酶抑制劑，不能用于研究蛋白激酶的研究。細菌蛋白提取試劑僅用于科研。

操作方法:
1、細菌可溶性蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的蛋白酶抑制劑和PMSF；混勻，放置在冰上備用；
將菌體濕重稱重，然后按照比例（1g：10ml）加入的新配置的裂解液，混勻，過程注意冰上操作；
將混勻液移入超聲儀中，超聲；
超聲條件：總時間45min，超聲時間3s，間隔時間3s，過程為冰浴環境；
超聲結束，w4度離心，10000r/min20min；
吸取上清新的管中；
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復凍融，避免長時間儲存。)

注意事項：
實驗過程，所有試劑都要需要預冷或者即融，保證操作過程中的低溫環境；
PSMF（有毒）現用現加，因為PMSF在水溶液中會快速降解；

用于大腸桿菌提取可溶性蛋白，試劑盒中的裂解液含有蛋白酶抑制劑，作用較為強烈，可快速獲得總蛋白，可用于免疫印跡實驗等基礎研究實驗，由于含有上述的酶抑制劑，不能用于研究蛋白激酶的研究。細菌蛋白提取試劑僅用于科研。

操作方法:
1、細菌可溶性蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的蛋白酶抑制劑和PMSF；混勻，放置在冰上備用；
將菌體濕重稱重，然后按照比例（1g：10ml）加入的新配置的裂解液，混勻，過程注意冰上操作；
將混勻液移入超聲儀中，超聲；
超聲條件：總時間45min，超聲時間3s，間隔時間3s，過程為冰浴環境；
超聲結束，w4度離心，10000r/min20min；
吸取上清新的管中；
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復凍融，避免長時間儲存。)

注意事項：
實驗過程，所有試劑都要需要預冷或者即融，保證操作過程中的低溫環境；
PSMF（有毒）現用現加，因為PMSF在水溶液中會快速降解；