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產(chǎn)品名稱(chēng):10000*SolarRed 核酸染料

產(chǎn)品型號(hào):G5560-0.5ml

產(chǎn)品報(bào)價(jià):

產(chǎn)品特點(diǎn):10000*SolarRed 核酸染料是一種靈敏、穩(wěn)定和相對(duì)安全的熒光核酸染色試劑。它可以替代高毒性染色劑-溴化乙錠(EB),用于瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠中dsDNA和ssDNA的染色。SolarRed的靈敏度遠(yuǎn)高于EB,并且不需要脫色。由于SolarRed和EB有相同的光譜特性,因此用它替代EB時(shí)不需要更換成像系統(tǒng)。

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G5560-0.5ml10000*SolarRed 核酸染料的詳細(xì)資料:

10000*SolarRed 核酸染料是一種靈敏、穩(wěn)定和相對(duì)安全的熒光核酸染色試劑。它可以替代高毒性染色劑-溴化乙錠(EB),用于瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠中dsDNA和ssDNA的染色。SolarRed的靈敏度遠(yuǎn)高于EB,并且不需要脫色。由于SolarRed和EB有相同的光譜特性,因此用它替代EB時(shí)不需要更換成像系統(tǒng)。

10000*SolarRed 核酸染料既可用于預(yù)制凝膠也可用于電泳后染色。通常電泳后染色的靈敏度更高,并能排除染料對(duì)DNA遷移的干擾。使用SolarRed進(jìn)行電泳后染色,操作簡(jiǎn)單不需要脫色和特殊溶液。只要將染料稀釋在0.1M NaCl中,并將凝膠置于染色液中,30分鐘后就可以觀察。染色液在室溫下極為穩(wěn)定,可以多次反復(fù)使用。相比而言,預(yù)制凝膠由于不需要額外染色過(guò)程,因此染料用量更少,更為簡(jiǎn)單經(jīng)濟(jì)。

除了的靈敏度和穩(wěn)定性外,獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室的毒性測(cè)試也顯示,在凝膠染色的濃度下,SolarRed沒(méi)有誘變性和細(xì)胞毒性。SolarRed安全性的關(guān)鍵在于它對(duì)于細(xì)胞膜*沒(méi)有通透性。

特點(diǎn):

1、無(wú)毒性:SolarRed*的油性和大分子量特點(diǎn)使其不能穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),艾姆斯氏試驗(yàn)結(jié)果也表明,該染料的誘變性遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于EB。

2、靈敏度高:適用于各種大小片段的電泳染色,對(duì)核酸遷移的影響小于SYBR Green I。

3、穩(wěn)定性高: 適用于使用微波或其它加熱方法制備瓊脂糖凝膠;室溫下在酸或堿緩沖液中極其穩(wěn)定,耐光性強(qiáng)。

4、信噪比高:樣品熒光信號(hào)強(qiáng),背景信號(hào)低。

5、操作簡(jiǎn)單:與 EB 一樣,在預(yù)制膠和電泳過(guò)程中染料不降解;而電泳后染色過(guò)程也只需30 分鐘且無(wú)需脫色或沖洗 ,即可直接用紫外凝膠透射儀觀察。

6、適用范圍廣:可選擇電泳前染色(膠染法)或電泳后染色(泡染法);適用于瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠電泳;可用于 dsDNA、ssDNA 或 RNA 染色。

與EB有相同的光譜特性,無(wú)需改變?yōu)V光片及觀察裝置:標(biāo)準(zhǔn)的 EB 濾光片或 SYBR 濾光片都適用,使用與觀察EB相同的普通紫外凝膠透射儀觀察即可。但是SolarRed不能被488 nm氬離子激光器或相似波長(zhǎng)的可見(jiàn)光*激發(fā),因此不推薦使用此類(lèi)激發(fā)裝置的成像系統(tǒng)。對(duì)于此類(lèi)裝置,我們推薦您使用gelred (Cat# G5560),它和SYBR Green I 的光譜相似,靈敏度相當(dāng),但更加穩(wěn)定。

SolarRed 使用方法簡(jiǎn)介

1.膠染法(用法同EB)(推薦方法)

(1) 制膠時(shí)加入SolarRed核酸染料(例如:每50mL 瓊脂糖溶液中加入5μL SolarRed 10,000× 儲(chǔ)液,

以此比例類(lèi)推)。

(2) 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。

注意事項(xiàng):

(1) 此方法染色染料用量相對(duì)較少。500 μL染料大約可以做100塊 50mL的膠。

(2) 由于SolarRed具有良好的熱穩(wěn)定性,可以在熱的瓊脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷卻。搖晃,振蕩或者翻轉(zhuǎn)以保證染料充分混勻。也可以選擇將SolarRed儲(chǔ)液加到瓊脂糖粉末和電泳緩沖液中,然后用微波爐或其他常用方式加熱以制備瓊脂糖凝膠。SolarRed兼容幾乎所有常用的電泳緩沖溶液。

(3) 如果總是看到條帶彌散或分離不理想,建議使用泡染法染色以確認(rèn)問(wèn)題是否與染料有關(guān)。如果染色后問(wèn)題依舊存在,則說(shuō)明問(wèn)題與染料無(wú)關(guān),請(qǐng)嘗試:降低瓊脂糖濃度;選用更長(zhǎng)的凝膠;延長(zhǎng)凝膠時(shí)間以保證邊緣清晰;改進(jìn)上樣技巧或選擇泡染法染色。

(4) 此方法不適合預(yù)制聚丙烯酰胺凝膠,對(duì)于聚丙烯酰胺凝膠請(qǐng)使用泡染法。

2.泡染法

(1) 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。

(2) 用H2O將SolarRed 10,000× 儲(chǔ)液稀釋約3,300倍到0.1M NaCl中,制成3× 染色液。(例如將15μL SolarRed 10,000× 儲(chǔ)液和5mL 1M NaCl加到45mL H2O中)。

(3) 將凝膠小心地放入合適的容器中,如聚丙烯容器中。緩慢加入足量的3× 染色液浸沒(méi)凝膠。室溫振蕩染色30min左右,染色時(shí)間根據(jù)凝膠厚度以及瓊脂糖濃度不同而略有不同。對(duì)于含3.5~10%丙烯酰胺的凝膠,染色時(shí)間通常介于30min到1h,并隨丙烯酰胺含量增加而延長(zhǎng)。

注意事項(xiàng):

(1) 用泡染法染色時(shí),染料用量較多。單次使用的染色液可重復(fù)使用3次左右。

(2) 3×SolarRed染色液可以大量制備,在室溫下避光保存直用完。

特別提醒:

(1) 如果您使用的是紫外成像儀,請(qǐng)選擇SolarRed ;如果您使用激光成像儀或希望在可見(jiàn)光下觀測(cè),請(qǐng)選擇SolarRed。

(2) 在極少數(shù)情況下,質(zhì)粒經(jīng)某些酶切后的DNA樣品會(huì)出現(xiàn)拖尾和分辨率降低,此時(shí)建議同時(shí)嘗試兩種染色方法以決定哪種方法更加合適。

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